Inactivación de cepas de Staphylococcus aureus procedentes de infecciones asociadas a prótesis articulares, mediante la herramienta CRISPR/Cas9

Abstract

Staphylococcus aureus es el agente causal más frecuente de infecciones asociadas a prótesis articulares. Cuando este se establece en la superficie de la prótesis formando biofilm, la matriz autosecretada favorece su supervivencia y resistencia a los antimicrobianos, desencadenando la cronicidad de la infección. Es así que en la actualidad existe un enorme interés en desarrollar nuevos tratamientos alternativos y/o complementarios al uso clásico de los antibióticos. En este sentido, se ha evaluado la eficacia de inactivación de cepas de S. aureus procedentes de infecciones asociadas a prótesis articulares, mediante la herramienta CRISPR/Cas9 contenida en tres plásmidos (previamente construidos en el laboratorio). La expresión del sistema CRISPR/Cas9 diseñado frente a dianas específicas y altamente conservadas en el cromosoma de S. aureus, produce una ruptura bicatenaria en el genoma y desencadena la muerte celular con una eficiencia del 100 % para los tres plásmidos analizados en este trabajo. Esta herramienta abre la puerta a futuros trabajos que permitan la búsqueda de estrategias que faciliten y potencien la aplicación de estas tecnologías a sistemas in-vivo.

Staphylococcus aureus is the most frequent causative agent of infections associated with joint prostheses. When it is established on the surface of the prosthesis forming biofilm, the self-secreted matrix favors its survival and resistance to antimicrobials, triggering the chronicity of the infection. Thus, there is currently an enormous interest in developing new alternative and/or complementary treatments to the classic use of antibiotics. In this sense, the inactivation efficacy of S. aureus strains from prosthetic joint infections has been evaluated using the CRISPR/Cas9 tool contained in three plasmids (previously constructed in the laboratory). The expression of the CRISPR/Cas9 system designed against specific and highly conserved targets on the S. aureus chromosome, produces a double-strand break in the genome and triggers cell death with 100% efficiency for the three plasmids analyzed in this work. This tool opens the door to future works that allow the search for strategies that facilitate and enhance the application of these technologies to in-vivo systems.