Person: Caballero Sánchez, Javier
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Caballero Sánchez
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Javier
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Producción Agraria
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Publication Open Access Identificación y producción de proteínas de Bacillus thuringiensis: evaluación de su actividad insecticída(2014) Caballero Sánchez, Javier; Palma Dovis, Leopoldo; Matas Casado, Isabel María; Escuela Técnica Superior de Ingenieros Agrónomos; Nekazaritza Ingeniarien Goi Mailako Eskola TeknikoaLa bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis (Bt) es el microorganismo más empleado actualmente como materia activa en el desarrollo de bioinsecticidas y la construcción de plantas transgénicas (planta Bt) resistentes a los insectos. Todo ello se debe a su gran capacidad para producir una enorme variedad de proteínas con elevada toxicidad contra un amplio número de especies de insectos que suelen originar importantes plagas agrícolasGforestales o de interés médicoGveterinario. En este trabajo se ha analizado el genoma de la cepa L60 de B. thuringiensis serovar ibérica (BtibGL60) con el objetivo de identificar genes que codifiquen para nuevas proteínas con potencial actividad insecticida por si mismas o una posible acción sinérgica para otras proteínas insecticidas ya descritas. El resultado más relevante ha sido la identificación de 5 nuevos genes que codifican para proteínas con similitudes del 99 %, 56 %, 44 % y 51 % a las proteínas Bel_Enhancin, Cry32Ba1, Cry66Aa2 y Vip4Aa1, previamente descritas y, en virtud de lo cual, se prevé que puedan tener actividad insecticida. Todos estos genes, excepto uno (el homólogo a vip4Aa1), se han logrado expresar, pero sólo en uno de estos casos (el homólogo a cry32Ba1) se ha conseguido obtener la proteína en fase soluble. La proteína soluble Cry32Ba1, así como las proteínas solubles que componen el cristal BtibGL60 y las que se encuentran en el sobrenadante de la fermentación de esta cepa, han sido caracterizadas mediante bioensayos para determinar su actividad insecticida. Los bioensayos cualitativos realizados contra 7 especies del orden Lepidoptera (Spodoptera littoralis, Spodoptera frugiperda, Mamestra brassicae, Chrysodeixis chalcites, Helicoverpa armigera, Ostrinia nubilalis y Lobesia botrana), una especie de Coleoptera (Leptinotarsa decemlineata) y una especie de Diptera (Ceratitis capitata) han revelado que ninguna de estas especies de insectos son susceptibles a ninguna de las proteínas evaluadas, excepto la moderada susceptibilidad mostrada por C. chalcites a la proteína Cry32Ba1 y por C. capitata a las proteínas del cristal de BtibGL60. Se discute el interés práctico y el alcance del estudio realizado dentro del campo de los bioinsecticidas microbianos