Abstract
La transformación plastidial ha tomado un gran interés en los últimos 20 años,
debido a sus diversas ventajas, como lo son su carácter poliploide y su herencia
materna. En este trabajo se han utilizado las variedades comerciales de Nicotiana
tabaccum (tabaco): Havana 503-B y Virginia Gold que han sido transformadas
previamente con el vector pL3, el cual incluye el gen tiorredoxina f y el gen ...
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La transformación plastidial ha tomado un gran interés en los últimos 20 años,
debido a sus diversas ventajas, como lo son su carácter poliploide y su herencia
materna. En este trabajo se han utilizado las variedades comerciales de Nicotiana
tabaccum (tabaco): Havana 503-B y Virginia Gold que han sido transformadas
previamente con el vector pL3, el cual incluye el gen tiorredoxina f y el gen marcador
aadA (resistencia a espectinomicina y estreptomicina). Una vez transformadas todas la
plantas y seleccionadas las plantas transplastómicas (transformadas a nivel del
cloroplasto) en un medio con espectinomicina, se considera recomendable eliminar el
gen marcador. Esta eliminación se realiza a través de la recombinasa Cre que se
introduce en el genoma nuclear por medio de la bacteria Agrobacterium tumefaciens. La
recombinasa Cre reconoce las regiones lox que flanquean el gen marcador aadA y lo
elimina del genoma plastidial. Los resultados de Southern blot muestran que la
eliminación del gen aadA se ha producido en un 34% de las plantas de variedad Havana
503-B y en un 39% de las Virginia Gold. Estas plantas son heteroplásmicas, ya que
mantienen un bajo porcentaje de plastomas que incluyen el gen marcador. [--]
Degree
Máster Universitario en Agrobiotecnología /
Unibertsitate Masterra Agrobioteknologian
